Мы осуществили сравнительную оценку ксеногенных фидеров из костного мозга лабораторных животных и обнаружили, что при клонировании строгальных фибробластов костного мозга человека стабильные (в пределах опыта) и воспроизводимые результаты получаются при добавлении в питательную среду летально облученных клеток костного мозга кролика. Применение фидера кролика позволило в 100 раз снизить плотность эксплантации клеток костного мозга человека. В этих условиях она составляет не более 5 x 103 ядерных клеток на 1 см2 дна культурального сосуда. Мы установили, что оптимальные результаты клонирования КОЕф получаются, если плотность эксплантации фидера не ниже 2 x 10° и не выше 5 x 105 летально облученных клеток костного мозга кролика на 1 см2 дна культурального сосуда. Добавление фидера в пределах первых 72 ч с момента эксплантации клеток костного мозга человека не влияет на эффективность клонирования КОЕф. Используя данную методику для клонирования строгальных фибробластов костного мозга человека, в культуре удастся получить гетерогенные по размеру и числу клеток колонии. По этим признакам их можно разделить на следующие два типа: однослойные рыхлые колонии, содержащие от 50 до 500 клеток, средний диаметр которых составляет 3,3 см ± 0,05 см и многослойные компактные колонии, содержащие свыше 500 клеток, со средним диаметром 4,6 см ± 0,09 см. В некоторых из колоний второго типа наблюдается синтез основного вещества кости с отложением кальция. Такие колонии непрозрачны имеют вид белых пятен на дне культурального флакона, т. е. в монослойпой культуре наблюдается процесс дифференцировки предшественников строгальных фибробластов в направлении остеогенсза. В настоящее время не ясно, какие клетки-предшественники образуют первый тип колоний. При клонировании КОЕф без фидера не удается обнаружить различий в их числе в разных участках костной ткани и при различных видах патологии человека. Применение ксеногенного фидера позволяет решать и эти задачи.
Мы исследовали костный мозг из грудины у 30 больных детей с воронкообразной грудью. При стабильных в пределах опыта значениях эффективности клонирования КОЕф минимальные значения ее были 13,3 ± ±1,8, а максимальные высаженных ядерных клеток. При другом виде костной патологии — остеомиелите — у 32 больных были исследованы образцы костного мозга из очага остеомиелита.