Визуализация мембранных антигенов

Для визуализации мембранных антигенов использовали пероксидазо анти пероксидазный (ПАП) метод В-лимфоциты (не активированные формы) идентифицировали с помощью реакции образования розеток с эритроцитами мыши. Большие гранило содержащие лимфоциты (БГЛ) выделяли дифференциальным центрифугированием в четырехступенчатом градиенте плотности перколла, как было описано ранее . Маркированные лимфоциты и клетки из обогащенных фракций фиксировали 1,6 %-ным раствором глутаральдегида фирмы в 0,1 М фосфатном буфере с сахарозой; постфиксировали 1,0 %-ным раствором тетраокиси осмия в том же буфере, обезвоживали спиртом и окисью пропилена. Для сканирующей электронной микроскопии клеточную суспензию наносили на алюминиевые диски и высушивали при критической точке в токе углекислоты Для трансмиссионной электронной микроскопии клеточную суспензию заключали в аралдит по общепринятой методике. Препараты изучали с помощью электронного микроскопа 1ЕМ-100С со сканирующей приставкой А8Ш-4Э.

Проведенные исследования показали, что Е-РОК различаются по своему размеру и строению. Ультраструктура поверхности Е-РОК при изучении ее с помощью сканирующего электронного микроскопа оказалась довольно вариабельной. Встречаются все шесть основных форм поверхности лимфоцитов, циркулирующих в крови, – от совершенно гладкой до содержащей многочисленные Микроворспнк или другие выросты, как было описано нами ранее  В результате исследований, проведенных в нашей лаборатории, было установлено что в крови человека среди Е-РОК преобладают два вида: небольшие лимфоциты (около 40 %) с относительно гладкой или волнистой поверхностью и незначительным числом лимфоциты несколько большего размера (их содержание не превышает .Ю %), несущие на поверхности многочисленные Полученные нами данные согласуются с последними работами результаты которых показали, что Т-лимфоциты крови, выявляемые как Е-РОК, функционально неоднородны и, следовательно, могут иметь различное морфологическое строение. Более ранние сообщения о том, что все Т-лимфоциты имеют гладкую поверхность, не нашли своего подтверждения.